ژنتیک پزشکی : تدریس فصل چهارم ژنتیک پزشکی امری (ایمری) جلسه چهارم
دورگه سازی اسید نوکلئیک به صورت خلاصه و کنکوری
دورگه سازی اسید نوکلئیک شامل روش‌های اصلی زیراست:
👈ساترن بلات
👈نورترن بلات
👈ریزآرایه‌های DNA (DNA Microarrays)
💥 ساترن بلات
مراحل انجام ساترن بلات به شرح زیر است:
۱⃣ هضم DNA ژنومیک توسط آنزیم‌های محدودگر
۲⃣ الکتروفوز قطعات بر روی ژل آگارز به منظورجدا شدن آنها براساس اندازه
۳⃣دناتوره کردن قطعات به وسیله قلیا یا گرما و انتقال آنها به صفحه نیتروسلولز با استفاده از خاصیت موئینگی
۴⃣ پختن در آون °C80 برای تثبیت اسیدهای نوکلئیک بر روی غشا
۵⃣آغشتن غشا به پروب‌های رادیواکتیو (توسط P 32) و شستن پروب‌های متصل نشده
۶⃣اتورادیوگرافی با قرار دادن بر روی فیلم X-Ray
🎯ساترن بلات در تعیین حذف‌ها، درج‌های بزرگ و جهش‌هایی که محل‌های محدودکننده در اطراف توالی ژنی تک نسخه‌ای را تغییر می‌دهند کاربرد دارد.
💥نورترن بلات
👈روش آن با ساترن بلات یکسان است ولی از mRNA، به عنوان اسید نوکلیک هدف استفاده می‌کنند. استفاده از بازدارنده‌های ریبونوکئازی، جدا سازی mRNA را امکان پذیر می‌سازد.
👈مشاهده تغییر در اندازه رونوشت mRNA امکان یک جهش در ناحیه غیررمزدار ژن مانند اتصال پیرایش در محدوده اینترون- اگزون را پیشنهاد می‌کند.
💥ریزآرایه‌ها و چیپ‌های DNA (DNA Chips / DNA Microarrays)
🎯مراحل:
۱⃣اولیگونوکلئوتیدهای نشاندارشده با فلئورسنس (پروب‌ها) به اسلاید شیشه‌ای میکروسکوپ اتصال می‌یابند.
۲⃣در این مرحله DNA هدف در معرض اولیگونوکلئوتیدهای نشاندار قرارگرفته و ردیابی می‌گردند.
۳⃣ الگوی رنگی به طورخودکار توسط رایانه مورد آنالیز قرار می‌گیرد.
🎯کاربرد:
۱⃣ مطالعات بیان به منظور مشاهده بیان تمایزی هزاران ژن درسطح mRNA
۲⃣ آنالیزگوناگونی DNA برای شناسایی جهش وتعیین نوع چند شکلی تک نوکلئوتیدی (SNP)
۳⃣ آزمون برای حذف¬ها و درج¬های ژنومی توسط آرایه دورگه سازی ژنومی (CGH)
۴⃣ ترکیبی از دو مورد ۲ و۳ یعنی SNP-CGH برای شناسایی ناهنجاری‌های ژنتیکی خنثی نسخه مانند دیزومی تک والدی
💥هیبریداسیون مقایسه‌ای ژنوم یا CGH (Comparative Genome Hybridization)
مراحل:
۱⃣دراین روش، DNA تومور (یا آزمون) با رنگ سبز و DNA کنترل با رنگ قرمز نشاندار می‌شوند.
۲⃣دو نمونه، مخلوط شده و به شکل رقابتی با کروموزوم‌های متافازی طبیعی هیبرید می‌شوند.
۳⃣با میکروسکوپ فلوئورسنت عکسبرداری صورت گرفته و شدت رنگ سبز و قرمز سنجیده می‌شود.
🎯کاربرد:
👈شناسایی نواحی حذف آللی یا تکثیر ژنی در تومورهای سفت و آنالیز سلولهای منفرد برای تشخیص پیش ازتولد
👈قدرت جداسازی برای حذف‌ها ۱۰ مگاباز و برای درج‌ها ۲ مگاباز است.
مطالب مرتبط :
ژنتیک پزشکی : تدریس فصل چهارم ژنتیک پزشکی امری (ایمری) جلسه پنجم (جلسه آخر)
ژنتیک پزشکی : تدریس فصل چهارم ژنتیک پزشکی امری (ایمری) جلسه سوم
کارشناسی ارشد ژنتیک انسانی در یک نگاه، تعریف، رشته های مجاز، دروس و ضرایب، منابع، زمان آزمون ۹۷-۹۶
منابع مطالعاتی کنکور کارشناسی ارشد ژنتیک انسانی
کلاس های آمادگی کنکور کارشناسی ارشد ژنتیک انسانی
در پایان به دانشجویانی که تمایل دارند از مباحثی که از ژنتیک پزشکی ایمری در کانال ژنتیک پزشکی متعلق به همین سایت تدریس می شود استفاده کنند پیشنهاد می گردد از طریق این لینک به کانال ژنتیک پزشکی بپیوندند.
