در قسمت دوم سری آموزش فوقالعاده PCR، به جزئیات مولکولی واکنش میپردازیم و دقیقاً میبینیم چطور DNA هدف به طور تصاعدی تکثیر میشه.
در این قسمت به این سؤالها پاسخ میدیم:
- در سیکلهای اولیه، چرا محصولات نیمهبسته (long products) تولید میشن؟
- از چه سیکلی به بعد محصولات با اندازه مشخص (fixed-length) و دقیقاً برابر با فاصله بین دو پرایمر ساخته میشن؟
- چطور تعداد محصولات در هر سیکل تقریباً دو برابر میشه و تکثیر تصاعدی اتفاق میافته؟
- در نهایت، داخل یک میکروتیوب برای انجام یک واکنش PCR استاندارد دقیقاً چه موادی اضافه میکنیم؟ (DNA الگو، پرایمرها، dNTPها، بافر، MgCl₂، آنزیم Taq Polymerase و…)
این جزئیات مولکولی نه تنها برای درک عمیق PCR ضروریه، بلکه در کنکور ارشد ژنتیک انسانی، بیوتکنولوژی پزشکی و علوم آزمایشگاهی هم سؤالات زیادی ازش طرح میشه.
در ویدیوی زیر، همه این موارد رو با انیمیشن ساده و توضیح گامبهگام براتون باز میکنم: